05/10/01 21:36:50
経験的にいって、
スクリーニングは-trp-leuで100万個コロニーが出る条件で、
-his-adeプレートにまいて、コロニーが100個でる程度が一番よく
本当のポジティブが取れる。
それ以上だと、擬陽性ばかりで話にならなくて、
それ以下(10個以下)だと、なにも無い。
上に書いたぐらいの頻度になるように調整するには、作ったベイトと
空のベイトを-hisのプレートにぬってみて、同じぐらい生えるのを基準にするとよい。
それと、一つの遺伝子しかやらないと、外れる率があるから、なんだかんだといって、
5つぐらいの遺伝子について、それぞれやったほうがいいよ。
ちなみに、上にかいたのはクロンテックの酵母とプラスミドとライブラリーの話です。
ライブラリーはだれかが、増やしたものは使わないほうがいい。
ライブラリーはクロンテックから買ったのをちゃんとプレートで増やしたものを使わないと
分野によっては何もとれない。(分野によっては取れるけどね)