05/10/01 21:26:04
そうそう、酵母にプラスミド入れたままにしてると、すぐにプラスミドがおかしくなるよ。
スクリーニングでポジティブが取れたら、すぐに-trp-leuの液体培地５０ｍｌに
コロニーをありったけいれて、３０度で、一晩から二晩振ってすぐにプラスミドを回収しないとだめだよ。
それと、酵母からプラスミドを回収するときは、エレクトロポレーションが標準だよ。
もし、ケミカルでしたければ、酵母の細胞壁成分を除くような方法でプラスミドをとらないとだめだよ。
05/10/01 21:26:04
そうそう、酵母にプラスミド入れたままにしてると、すぐにプラスミドがおかしくなるよ。
スクリーニングでポジティブが取れたら、すぐに-trp-leuの液体培地５０ｍｌに
コロニーをありったけいれて、３０度で、一晩から二晩振ってすぐにプラスミドを回収しないとだめだよ。
それと、酵母からプラスミドを回収するときは、エレクトロポレーションが標準だよ。
もし、ケミカルでしたければ、酵母の細胞壁成分を除くような方法でプラスミドをとらないとだめだよ。