08/03/15 21:51:26
何これ？ｗ
258 名前：4月から無色 ：2008/03/15(土) 21:17:17
研究人生オワタ＼(^o^)／学振PDまる三年間データ無し論文きれいにゼロ！
401:名無しゲノムのクローンさん
08/03/15 21:53:06
弐号缶にときどき棲息してるyo
402:名無しゲノムのクローンさん
08/03/15 21:55:14
>>401
くだらないコピペ荒らしは弐号館出身ストーカーのしわざか
次は名前欄を消し忘れるなよｗ
403:名無しゲノムのクローンさん
08/04/07 00:30:09
age
404:名無しゲノムのクローンさん
08/04/11 12:38:56
来年Ｄ７になるものですが、
教授と仲悪くて、推薦書
書いてもらえそうもありません。
今年卒業できるかもわかりません。
うちの大学にはＤ６までしかありません。
こんなボクはどうしたらいいのですか？
共著も含め、まだ一報もありません。
今年31歳です。
405:名無しゲノムのクローンさん
08/04/11 20:43:41
>>407
推薦書はいいからとりあえず卒業しなよ
406:名無しゲノムのクローンさん
08/04/11 23:22:19
そういう状況になることがわかっているのに、なんで教授と仲悪くなるような
振る舞いをするのかな？
407:名無しゲノムのクローンさん
08/04/13 22:52:16
坊やだからさ
408:名無しゲノムのクローンさん
08/04/13 23:09:05
誰か言うと思ったわ
409:名無しゲノムのクローンさん
08/04/14 00:32:44
>>408みたいなのはiPSも誰かやると思ったわとか言ってしまうタイプ
いわゆるピペド脳だ
410:名無しゲノムのクローンさん
08/04/14 01:26:33
>>406
ピペドの目的が正しいからだ！
411:名無しゲノムのクローンさん
08/04/14 01:41:39
んなわけないだろｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗｗ
412:名無しゲノムのクローンさん
08/04/17 21:56:31
アカハラ・セクハラ総合対策スレッド
ｽﾚﾘﾝｸ(student板)
学生・ポスドクを飼い殺しにする教授
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
教授の理不尽さについて語るスレ
ｽﾚﾘﾝｸ(bake板)
【行列のできる】教授のセクハラ【相談所】
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
就職活動したいのだけど教授が邪魔をしてうざい
ｽﾚﾘﾝｸ(rikei板)
日本の教授の問題点を議論するスレ
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
【うやむや】教授のセクハラ【握り潰し】
ｽﾚﾘﾝｸ(shihou板)
なぜ日本の教授には助手が必要か？
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
413:名無しゲノムのクローンさん
08/04/29 14:14:22
心理・教育のセクハラ・アカハラを晒すスレ
ｽﾚﾘﾝｸ(psycho板)
【ｵﾚﾓ】研究者に人格者はいない？【ｵﾏｴﾓ】
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
★いじめの激しい研究室について語るスレPart2★
ｽﾚﾘﾝｸ(bake板)
終わってる研究室
ｽﾚﾘﾝｸ(bake板)
アカハラ・セクハラについて＠裁判・司法(仮)
ｽﾚﾘﾝｸ(court板)
アカハラをなくそう！
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
ブラック研究室
ｽﾚﾘﾝｸ(rikei板)
DQN助手がしつこすぎ？
ｽﾚﾘﾝｸ(life板)
アカハラ, 1
ｽﾚﾘﾝｸ(bake板)
414:名無しゲノムのクローンさん
08/05/03 10:46:58
NO炭は学生やﾎﾟｽﾄﾞｸだけでなく、ｽﾀｯﾌも買い殺しデツ
415:名無しゲノムのクローンさん
08/05/03 13:24:45
ダントツ享受をつかまえて失礼なこと言うなよ。
416:名無しゲノムのクローンさん
08/05/04 20:35:02
URLﾘﾝｸ(professor-i-room.sblo.jp)
417:名無しゲノムのクローンさん
08/05/04 22:49:32
↑
URLﾘﾝｸ(professor-i-room.sblo.jp)
読んだけどすげーくだらなかった
こんなやつがうちのラボにいたらとりあえず叩きだすか、ちょっと厳しい目の
テーマ出してツブす
418:名無しゲノムのクローンさん
08/05/05 13:54:42
DQN学生の典型か ぷ
419:名無しゲノムのクローンさん
08/05/05 21:02:57
厨房くさいな
420:名無しゲノムのクローンさん
08/05/06 09:34:04
ブログを本人の自己満足で書くもんと規定するか、全世界へ向けての発表のチャンスととらえるか、
好きにさせとけば、どうせ誰の目にも止まらんよ
421:名無しゲノムのクローンさん
08/05/07 02:15:39
俺は面白かったよ。一体どこの大学だろう？
422:名無しゲノムのクローンさん
08/05/10 22:01:20
死にそうだw
423:名無しゲノムのクローンさん
08/05/10 22:09:16
ピペド脳は正しい
424:名無しゲノムのクローンさん
08/05/10 22:37:20
追い込む 【動詞】
恐怖あるいは不安感を煽ることにより
他人の行動をコントロールするための
基本テクニックの一つ。他人に非合法
な行動や自暴自棄な破滅的行動をとら
せることを目的にする。その行動をと
ることを直接的に指示・示唆するので
はなく、不安の心理状態を巧みに操作
し、その行動をとることは本人のとっ
ても不利であることを理解させつつ、なお
本人に選択させるのが、【強要する】との
最大の相違点である。
425:名無しゲノムのクローンさん
08/05/11 09:59:15
教授のチンポしゃぶれない野郎は性長しないね
426:名無しゲノムのクローンさん
08/05/11 10:25:21
正しい学生・ポスドクの飼い殺しの仕方
１．学生が論文を書いて持ってくる
２．投稿前に教授がデスクの上につんでおく
３．約半年放置
４．それくらいたつと関連論文がふえてディスカッション
書き直しになるので
５．またかきなおさせる
２．にもどる。
www
427:名無しゲノムのクローンさん
08/05/11 11:57:33
１．で持ってきた原稿が、どこから手を入れれば良いのかわからないような代物だからそうなるんじゃねぇの？ｗ
428:名無しゲノムのクローンさん
08/05/11 12:18:27
無能な学生は自覚がないから飼い殺されてると勘違い
能力が足りないだけなのにな
429:名無しゲノムのクローンさん
08/05/11 13:00:06
教授のチンポしゃぶれない野郎は性長しないね
430:名無しゲノムのクローンさん
08/05/17 22:28:54
あ
431:名無しゲノムのクローンさん
08/05/29 10:24:27
駅弁大学工学部にとって欲しい准教授とは
①間接経費付きの資金がとれる
②企業との共同研究をとってこれる
③評判のよい講義ができる
④学内委員など雑用能力が高い
⑤特許につながる研究テーマを持っている
番外：論文は過去５年で筆頭３本共著２０本程度で十分（D○合）
要らない人材
①外部資金実績がないのに大量の論文実績がある
②間接経費のない中途半端な外部資金を持ってくる
③学会委員などの仕事を持ってくる
うちの工学部長が望ましい教員像ということで学長に言われたらしい
早い話が論文<<<<<<<<<<大学に入る金 ということみたいですね
432:名無しゲノムのクローンさん
08/06/01 02:13:54
H本准教授
433:ポス毒喫茶
08/06/02 22:54:29
鬼軍曹にシゴかれる「軍曹喫茶」 サー！イエッサー！
ADスクエアで「軍曹喫茶」が31日に開催された。告知ブログでの軍曹喫茶とは？によると
『海兵隊訓練キャンプ風萌え成分入り喫茶』で、お客さんは新兵。１Ｆがハードコース・２Ｆ
がソフトコースで、ハードコースでは元アメリカ海兵隊軍曹が新兵（お客さん）を罵ったり、
腕立て伏せをさせていた。
ハードコースでは、本物の元アメリカ海兵隊軍曹が、新兵（お客さん）をはげしく罵ったり、
ステージの上で新兵（お客さん）に腕立て・ジャンプをとかをさせていて、この元海兵隊軍曹は
『これくらいはアメリカ海兵隊では日常茶飯事』のようなことを言ってたみたい。
URLﾘﾝｸ(blog.livedoor.jp)
434:名無しゲノムのクローンさん
08/08/14 09:35:54
age
435:名無しゲノムのクローンさん
08/08/14 15:00:47
ピペドは飼ってくれるだけボスに感謝すべき
436:名無しゲノムのクローンさん
08/08/16 22:05:43
高齢ポスドク（こうれいポスドク）は、比較的年齢の高いポスドク。広義には高齢のポスドクを
意味するが、狭義においては35歳以上のポスドクを意味する。
2000年代前半にポスドク一万人計画によって大量にあふれたポスドクのうち、研究の世界で
生き残れる条件として、教授たちの間にあった「35歳までに助手にならなくてはならない」
という認識に由来する。実際に当時の助手の公募においても35歳以下という条件がつけら
れることが多かった。もともとこれは文部科学省からの通達にあった
「大学院卒業後は競争的環境にあることがのぞましく35歳までには常勤職に就くことが望ましい」
という記述に由来するが、いつしか35歳を越えるまでは奴隷のように酷使し、
35歳を過ぎれば捨ててしまえばよいという認識へと変わった。
URLﾘﾝｸ(www.geocities.jp)
博士が100人いる村」この創作童話は静岡県三島市の国立遺伝学研究所の風景と非常によくにている
437:名無しゲノムのクローンさん
08/08/30 11:24:12
宮廷教授のすべてが業績あるわけではないよーん。
しょぼい奴もまぎれこんでる。
広島や神戸にも学会を代表する研究者はいます。
岩手医科大薬学部長とか。
今や底辺大学を除くと、所属先と業績は関係ありましぇーん。
当方中堅私大だが、宮廷には何の魅力も感じておりません。
宮廷に移ったところで、院生の世話をしなくてはならず面倒くさい、給料が下がる、
定年退職後の第二就職先が確保されるか不明、マスコミを含む世間も今や宮廷教授という
肩書きだけでは相手にしてくれない、もちあげてくれるのは院生と職員くらい？
438:名無しゲノムのクローンさん
08/08/30 14:38:56
岩手医科大の前の学長は分子生物学会の会長だもんね
439:名無しゲノムのクローンさん
09/02/04 12:03:04
全国津々浦々の大学に巣喰う５ー１０年間一つも業績を出さない高齢万年助教の生クビを切れば２００ー３００のポストに空きが出来るんぢゃないかな
440:名無しゲノムのクローンさん
09/03/20 00:10:57
ものっすごいブランクのあるスレだな
関係ないけど
ばあちゃんといっしょにデパートへ出かけて
おもちゃかってもらえたあの時代は戻ってこない
と思ったら切なくて切なくて
441:名無しゲノムのクローンさん
09/04/14 17:54:13
独身美人女性ポス毒にしつこくまとわり憑く卑劣な不細工裳てない殉凶獣がいまつ
442:名無しゲノムのクローンさん
09/04/25 23:35:40
山本雅
443:名無しゲノムのクローンさん
09/05/13 13:32:04
東北大大学院生が自殺…博士論文、２年連続受け取り拒否され
東北大は１３日、大学院理学研究科で教員の指導に過失があり、
担当していた大学院生の自殺につながったとする内部調査結果を公表した。
大学院生は２年続けての教員による博士論文の受け取り拒否などで修了できなかった。
同大は懲戒委員会で処分を検討しているが、この教員は今月に入り辞職した。
同大によると、自殺したのは理学研究科で生物関係の研究をしていた博士課程の
男性大学院生（当時２９歳）。大学院生は昨年８月、研究のデータ集めをした滋賀県内で自殺した
。遺書には指導法への不満などはなかったが、翌月、両親から男性准教授（５２）の指導に
問題があったのではとの指摘を受け、内部調査委員会を設置していた。
大学院生は２００７年１２月、博士論文の草稿を事前提出したが、
准教授は大学院生と十分に議論せず、受け取りを拒否。
准教授は０６年１１月ごろにも、論文提出を延期するように指示しており、
大学院生は２年連続で博士号の取得に失敗した。
調査は、残された論文草稿や実験データを見る限り、
大学院生の研究は博士論文としての水準に到達していたと判断。
准教授が、具体的な指示を与えず、適切な指導を行わなかった結果、
大学院生は学位取得や将来展望に希望を抱けなくなり、
自殺に至ったと結論づけた。
444:Nanashi et al.
09/05/19 12:22:30
最近、日本気象学会でアンケート調査が行われたようです。
URLﾘﾝｸ(chikyu-to-umi.com)
URLﾘﾝｸ(chikyu-to-umi.com)
私としては、原則定年制、でも働きが悪ければクビもありうる、
というあたりが理想だと思います。
445:名無しゲノムのクローンさん
09/05/23 08:46:48
ポスドク経験のない俺は勝ち組？
446:名無しゲノムのクローンさん
09/05/23 13:04:04
>>444
その状態で変な教員やら公務員が溜まったから中途半端に任期制導入したんだよ。
研究と授業を棲み分けて、教授会を無くして、それから客観的な首切りガイドライン
を導入してやればいいのに。
>>445
ポスドクしないで社会復帰したなら勝ち組。
ポスドクしないで任期無し助教になっても勝ち組。
任期付き助教なら勘違いしてる。
447:名無しゲノムのクローンさん
09/05/23 14:02:03
>>446
全員任期制にしたら、誰もが目先のことしか見ないから、大学や研究所全体を
見渡す運営が出来なくなる。また、わざわざ人生で損をする職を目指す人は減るだろう。
アメリカはテニュアを取るまでは競争が厳しい、でも、テニュアを取ってしまえば、
一生涯働け、日本以上に職は安定する。もちろん、テニュアをとったら、
研究をしなくなる教員もそれなりにいる。（但し、予算獲得に関する競争は一生続く）
448:名無しゲノムのクローンさん
09/05/24 22:47:25
アメリカが良いのは、予算取れない教授は相部屋に押し込められても文句言えないところ。
日本が駄目なのは、予算取れないくせに実験室を減らされることもなくのうのうとしていられるところ。自戒をこめて・・・
449:名無しゲノムのクローンさん
09/05/29 00:48:30
予算取ってても昔からいるお年寄りに実験室を占拠されてまつ。。
450:名無しゲノムのクローンさん
09/07/11 11:18:40
>>448
でも、なぜか日本は少ない予算でそれなりの結果を残しちゃうんだよな
マジメな国民性かな
451:名無しゲノムのクローンさん
09/07/11 11:39:40
>>447
テニュアトラックが普及するまでは、現状の教授と准教授は逃げ切れるわけだ。
452:名無しゲノムのクローンさん
09/07/11 11:54:05
＞教授と准教授は逃げ切れるわけだ。
そんなに巧くゆくかな？
453:名無しゲノムのクローンさん
09/07/27 06:45:46
教授が死ぬまでポストは空かないの？
454:名無しゲノムのクローンさん
09/07/28 09:26:36
加藤のぶえ君、そろそろ首筋に
455:名無しゲノムのクローンさん
10/02/09 20:21:07
ロンダ妻子持ち、Ｄ５で国内学会誌１ｓｔ１本の博士号取得、
その後は２ヶ所で６年間ﾎﾟｽ毒、まったく業績無し
そろそろ３５才
マヂやばくね？
ラボに１人とか２人しかﾎﾟｽ毒がいない状況でそれでは、ボスは我慢できんだろｗ
俺が教授ならノー論文が２年続いたら躊躇無く叩き出すな
456:名無しゲノムのクローンさん
10/02/09 21:02:15
>455
だからお前は早く病院に行け、取り返しが（ry）
つかねえか、、、。まあ、いいやここでコピペしてなんとか
精神をつなぎ止めろ。相手してやるから。
457:名無しゲノムのクローンさん
10/02/13 23:43:02
何年も論文が出ないまま高齢ポス毒を飼い続ける教授って、ポス毒の人生を潰しているだけなんだよ
まっとうな考えの教授は心を鬼にして目標を短期に置いて、尻を叩き罵倒してでもデータを出させて
ゴミみたいなデータでもまとめさせて、低いIF雑誌でもいいから論文を投稿させる
それが出来なければ３ヶ月以内に余所に行け、ここにても君に将来は無いから、
研究テーマの合っている別のラボか非研究職種に逝け、とはっきり言う。
１stが2-3報しかなくてアカポスの見込みの無い４０才近いポス毒をわざわざ採用する教授に温情があるわけぢゃない。
弟子でも無い人間のその後のことなんか考えてるはずがない。テクか派遣のつもりで使ってるだけ。
458:名無しゲノムのクローンさん
10/02/27 23:30:34
>>455
, ──- ､
／ /⌒ ヽ ⌒ヽ＼
/ , -|／ ・|・ ＼| ､ ヽ
/ ／ ` ─ ●ｰ ′ ヽヽ
ｌ / ─ | ─ | 「いいかい？ポス毒くん、もっと現実見なよ
| / ─ | ─ | もうキミだけだよポスト獲得できてないの・・・
| ｌ ─ | ─ ｌ あの駅弁博士のジャイアンでさえ私大で専任教員になったってのにキミときたら・・・
ｌ | ／￣￣￣￣｀ヽ / 毎日2chで愚痴ってる場合じゃないんだよ
ヽ ヽ （＿＿＿＿＿ノ ／ 面接で土下座や面接官の靴舐める覚悟がないとダメだよ？
>━━━ Ｏ━─（ _ ） このままではキミは永久にポス毒だよ？それでもいいの？」
/ ／ ヽ ／
459:名無しゲノムのクローンさん
10/03/01 02:49:11
切り出し精製を嫌がる理由って判る？
単なる遺伝子導入なのに切り出し精製はダメって言われて、
成功したサンプルを廃棄させられた(実はとってあるけどｗ)
それでチマチマと違う抗生物質耐性のプラスミドに移しては培養・ミニプレップ・切って張ってを繰り返して、
目的のプラスミドを作る直前にTEを入れられ
挙げ句に作業が遅いと宣われましたorz
時間かかってるの明らかに培養時間の所為だし、
それを指示したのはアナタなんですが!! とか考えたら負けですか
460:名無しゲノムのクローンさん
10/03/01 03:23:39
>459
ごめん、神がかった読解力がないと何を言ってるのか解らないよ。
461:名無しゲノムのクローンさん
10/03/01 07:29:30
ＰＣＲしたらあかんって言われてるんじゃないの？
462:名無しゲノムのクローンさん
10/03/02 21:07:03
ノックアウト作るのに、いまだに切り貼り意外認めない（理解できない）アホ丸出しな教授もいるからな。
463:名無しゲノムのクローンさん
10/03/04 02:37:45
459です。障害に阻まれ遅レスすみません。
意味不明なカキコで申し訳ない。
要すると実験で無駄な遠回りをあえてさせられて、
理由があるのかと思えば不明瞭な答弁に終始され、
やる気が空回りして怒りに変わり叫んでしまいました。
行ってる内容はタンパク質を合成させるために
Tベクターに導入されているDNA断片を
別のプラスミドに移し替えるだけの単純な作業です。
さして難しい操作ではないし、もう1ヶ月弱も
時間をかけているのに、終わりが見えないのはなぜ(怒)？
方法についての疑問はスレ違いなんで
ヨソで投げさせてもらいます。ではでは
464:名無しゲノムのクローンさん
10/03/04 10:50:29
>行ってる内容はタンパク質を合成させるために
>Tベクターに導入されているDNA断片を
>別のプラスミドに移し替えるだけの単純な作業です。
ふつう思いついてコンストラクト作成、発現精製、SDS-PAGE,CBB染色は三日で済む作業だろ
465:459
10/03/04 11:58:19
>464
ですよね。ところがプラスミドも出来てない現状ですｗ
先輩がインサートDNAのプライマーを設計してくれたのですが、
制限酵素サイトの前に数塩基置くのを忘れ、
よりにもよってメチラーゼ活性あるのを選んでくれましたｗ
別の制限酵素が使えることが判ったのでやっと進むかと思えば
教授が手法がイヤだとか言い出し差し戻しｗ
教授が満足する手法で始めたら、
久しぶりに実験したくなったとか申され差し戻しｗ
お陰で10回くらいミニカルチャーしてるんじゃないでしょうかｗ
あまりの進度に嫌気が差して今は就活してます(爆)
466:名無しゲノムのクローンさん
10/03/04 12:59:28
プライマーに制限酵素サイトがあろうがなかろうが、pGEX、pMal,pET,pCMVとか発現ベクターのSmaIサイトかEcoRVの
平滑末端サイトにKOD plusやらVentで増幅したPCR断片を直接ライゲーションすれば
コンストラクトなんか二日で終わるだろw
PNKやCIP処理とかすれば無問題だし
467:名無しゲノムのクローンさん
10/03/04 21:22:56
どう見ても研究費を使わせないための教授の策略です。本当にありがとうございました。
468:名無しゲノムのクローンさん
10/03/04 23:10:47
切り出し精製って、ゲルからの抽出ではなくプラスミドからの切り出しが嫌だということ？
それでわざわざPCRでやってんの？
469:459
10/03/05 01:49:55
>466
平滑末端を直接ライゲーションする術があるんですね。
勉強不足の身にありがたいです。調べて今後の糧にさせて頂きます。
ついでになぜ使わないのか教授の機嫌を損ねないようにさり気なく聞いてみますｗ
>467
…言わないで下さい。泣けますからｗ
>468
PCR産物をTベクターに導入したものをとりあえず最終的にpETに移したいのですが、
両方Amp耐性のプラスミドのためセレクションがかけられず
→制限酵素処理して泳動したゲルを切り出し精製してベクターを除いてpETに導入
とゆう方法で行こうとして操作していたら切り出し精製はダメと言われる(爆)
→そうゆうことでCm耐性のプラスミドに導入して選別後pETに導入
とゆう方法に変更。
次pETに入れる段でミニプレップしたサンプルを
直接の指示にてTEに溶かされ、制限酵素の利きが著しく悪化ｗ
TEで内心キレて自主的に春休みになりましたｗ
指示が飛んできた辺りで追加の指示をたくさん貰っちゃって折れた感じです。
ってかTベクターに入れたなら確認にシーケンスくらいすればいいのに
未だに許可が下りずｗ(機器は空いてる気配ですｗ)
470:459
10/03/05 02:11:14
>469
とりあえず理不尽だなと思ってるのは
『なぜ切り出し精製がダメなのか』
→コンタミする可能性がとか仰ってました。何が混ざるんだろ？
『なぜTEに溶かした』
→D3の方の指示でDWに溶かしていた時はよく切れてたんですよ。
教授ご本人が制限酵素処理なさった結果
「利きが悪いな～」とか呟いてました。多分理由はEDTA…
『サンプルコレクター』
→なぜTEに溶かしたって結局コレクション増やしたいだけじゃないかと…
ミニプレップ産物だけTEに溶かして保存するのかと思えば
大腸菌のグリストの作成まで申しつけられました。
頻繁に使うなら兎も角プラスミドあれば十分じゃないでしょうか?!
ご指摘頂き更に
『なぜpETに直接入れさせなかったのか』
とか…
まぁ配列が望み通りになってるか確認するため、
プライマーがあるベクターに入れたかったとか聞きましたが、
ならシーケンスさせろよっ！
実験差し戻しは茶飯事化し、無意味に工数ばかり増え、
もはや目的(タンパク質合成)を忘れてる気すら…(爆)
471:名無しゲノムのクローンさん
10/03/05 07:35:57
>>465
制限酵素サイトの前に数塩基置くのを忘れ、
よりにもよってメチラーゼ活性あるのを選んでくれましたｗ
メチラーゼ活性のないＪＭ１１０なんかをトランスフォーメーションしてそこからＤＮＡを回収すればＯＫ
472:名無しゲノムのクローンさん
10/03/05 10:50:24
オリゴDNAプライマーなんか安いし早いし、さっさと再注文しる
473:459
10/03/05 22:02:28
>466
確度の高いPCRを使えとゆうコトだったんですね←調べたｗ
いつもPCRはEX Taqしか使わないため、
DNAは大腸菌で増やすものとゆう先入観がありました。
>471
その様ですね。
メチラーゼ活性について知った時に菌株の一覧表で見た株です。
別の方もオススメされていたので、
dam-の中では扱い安い株なのかな～とか思いました。
>472
問題はプライマーより教授です。
シーケンスさせてくれと申し出ると、「それより先に～(云々)」
とかわされます。なぜだ～!! …自分がやりたいのかな？
474:名無しゲノムのクローンさん
10/03/06 00:29:19
ぼくは人の能力の高い低いを論じられるほど賢くはないが，指導教官よりも
有能な学生さんがいるとしたら，学生さんからすればさぞストレスだろうと思う。
いまはただ耐えて，はやく出世して欲しい。
475:名無しゲノムのクローンさん
10/03/06 06:07:07
リコンビナントをとるのにシークエンスしていないのは問題外だろう。
プルーフ付きのポリメラーゼだろうがエラーは入る。missenseならともかくnonsenseだったら
どうするんだよ。まずはおおもとのT-vectorのクローンが正しいかどうかの確認が一番先だろ。
476:459
10/03/12 04:01:05
レス遅れてすみません。
>474
総花的な仰り方なので僕に宛てられた文章なのか判りませんが、
もし僕に向けられた言葉でしたら自分が有能とは思っていません。
今回の件に関しては教官の思惑や凡ミスも考えられるので、
もう少し教官の意向に沿ってみようかと思います。
>475
普通シーケンスしますよねぇ。
会う度にシーケンスはいつするのかを聞いており
忘れられているとは思えず、
かつ毎度華麗にスルーされているので、
もう既に誰かがシーケンスしたけど何らかの都合により隠されている
(e.g.データがディレクトリのどっかに消えた プリントしたけど地層に沈んで化石になった etc...)
等ポジティブ(?)に考えてみます。
多くの皆さんにご意見頂きありがとうございました。
これからは言われたコト"も"コナしつつ、
逞しく成果を出せるよう励む所存です。
477:名無しゲノムの食えおーん
10/06/20 13:42:36
実験方法教えてOkwaveみたいなレスになってないか？苦労ニングの方法なんてどうでもええ。方法は無限通りある。
478:名無しゲノムのクローンさん
10/06/20 22:52:52
正しく配列を増幅させたい時ってKOD派？primestar派？
後者はどんな酵素はパンフよんでもなぞだが
479:名無しゲノムのクローンさん
10/06/20 23:46:09
>>470
今気づいたので遅レスだけど、DNAをTEに溶かしたせいで制限酵素で切れなくなるなんて、ありえないよ。
制限酵素バッファーにマグネシウムイオンがどれだけ入ってるかわかってるか？
まあ、他の愚痴については同情するが。
480:名無しゲノムのクローンさん
10/06/20 23:54:13
ん？最近はTaqポリメラーゼとかTthポリメラーゼは使わないのかね？
私が院生の頃はこれらの酵素が熱で失活しないことが大発明とされて
ミネラルオイルを反応液に入れてサーマルサイクラーという最新機器を
使うとDNAがたちどころに増えたものよ。
481:名無しゲノムのクローンさん
10/06/21 01:51:45
KODシリーズってたくさんありすぎ。
KOD
KODPLUS
KODPLUS ver2
KODDASH
KODFX
KODPLUSNEO
482:名無しゲノムのクローンさん
10/06/21 02:11:27
もっともFidelity最強なポリメラーゼってどこのやつなんだろな
483:459
10/06/22 09:13:32
>477
すみません。
最初は腹立ち紛れに書き込みしてたのですが…
>479
DWに溶かしてた要領で切っていたのが敗因かと
参考までに組成を挙げますと
DNA 16μL(TEに溶かしたもの),
BamHⅠ 1μL,EcoRⅠ 1μL,*10K 2μL,
トータル 20μL
せめて水で希釈すれば良かったんですよね(爆)
484:名無しゲノムのクローンさん
10/06/24 03:40:03
>>483
「*10K」というのがよくわからないが、タカラなどの酵素に付いてくる buffer K のことかな。
そうだとしたら、buffer K を使って EcoRI で切ろうとするのは無茶だと思う。
タカラのページでは、EcoRI は buffer K ではスター活性が出やすいと書いてある。
URLﾘﾝｸ(catalog.takara-bio.co.jp)
切れなかったのは、まず間違いなくTEのせいではない。
1x buffer K には 10mM の Mg イオンが入っている。
TEに含まれるEDTAはせいぜい 1mM。
10mM の Mg イオンが 9mM になったところで、制限酵素の活性にはほとんど違いは出ない。