11/04/16 16:44:09.29
PCRを行うときに相補する配列だけでなく、付加したい配列をプライマーに付け加えることってありますよね？
これって、どれくらいの長さまでいけるものなんでしょうか。
現在、自分では相補する19塩基＋相補しない21塩基で、40塩基のプライマーで成功したことはあります。
ただ、今回追加したい配列は50塩基を超え、相補する配列を足すとプライマーの長さは70塩基を超えてしまうのです。
こういう場合、サブクローニングなどで2回に分けて配列を付加するべきでしょうか？
あくまで経験談で良いので、「俺、こんな長いプライマー作ってＰＣＲ成功したぜ」とかあれば聞きたいです。