20/07/10 01:26:38.08 PITVT6q9m
>>375 つづき
PEMF信号がROSの形成を刺激するかどうかを判断するために、DmCryを過剰発現するSpodoptera frugiperda(Sf21)昆虫細胞
培養物[28]を、ROSラベルである{5-(および-6)クロロメチル-2'、7'-ジクロロフルオレセインジアセテート}(DCFH-DA)の存在下
でPEMFによって青色光で15分間刺激しました[17,28]。共焦点画像分析により、刺激されていない培養物と比較して、PEMF処理
細胞での蛍光シグナルの顕著な増加が明らかになりました（図1C）。対照的に、DmCryを欠くSf21細胞では、PEMF刺激の目に
見える効果は観察されませんでした（S4図）。これらのデータは、PEMF刺激がROSの細胞内蓄積につながり、この効果には
ショウジョウバエのクリプトクロムが必要であることを示しています。フラビン結合親和性は、脊椎動物のクリプトクロムに
対してin vitroで低いと報告されていますが[31]、それでもトランスジェニックハエの発現に光感受性の表現型が付与され
[16,27]、鳥の網膜で光感受性の構造変化が起こり[15,32]、そのフラビンは生体内で結合されることを示しています。
さらに、脊椎動物型のクリプトクロムは、EPR分光法を使用して、全細胞培養で光還元とフラビンラジカルの形成を受けること
が示されています[33]。これらの特性は、他のクリプトクロムと同様に、フラビン酸化還元状態の相互変換を受けてROSを形成
する能力と一致しています[17,28,34]。